Содержание
Однако и бескапсульные формы H. influenzae представляют немалый интерес для медицины. Персистируя за счет закрепления на муцине носоглоточной слизи, они нередко служат причиной среднего отита и синуситов. С ними связана широко распространенная патология респираторного тракта — хронический бронхит. Этому способствует мутационная изменчивость иммунодоминантных белков наружной мембраны. Она обеспечивает селекцию и длительное выживание бактерий на фоне иммунного ответа.
Современное название палочки инфлюэнцы (Haemophilus influenzae) сочетает в себе память об искренних заблуждениях ученых, считавших ее возбудителем гриппа (инфлюэнцы), и абсолютную зависимость от крови при росте на искусственных питательных средах. Родовое наименование (Haemophilus) распространяется на небольшую группу бактерий (около 20 видов), причисляемых к так называемым гемофилам. Их уникальная зависимость от крови обусловлена тем, что, предпочитая аэробный тип метаболизма, они не способны синтезировать гемин, входящий в состав ферментов дыхательной цепи, и никотинамидадениндинуклеотид — НАД (или НАДФ) — ключевой кофактор окислительно-восстановительных ферментов. Одного этого вполне достаточно, чтобы объяснить абсолютную зависимость гемофилов от человека и животных. Оба ростовых фактора (гемин и НАД — факторы Х и V) эти бактерии легко получают из крови, а потому их всегда культивируют на кровяных средах. Лучше пользоваться «шоколадным» агаром (он имеет темно-коричневый оттенок), который получают прогреванием кровяного агара при 80°С для высвобождения из эритроцитов гемина и НАД.
Если кровь (эритроциты) является единственным источником гемина, то обогащения среды фактором V можно добиться разными способами. При изготовлении питательных сред его стандартным источником служит экстракт дрожжей. Требуется лишь помнить, что в отличие от гемина НАД не очень устойчив к высокой температуре и длительное кипячение (с целью экстрагирования) разрушает его. На зависимости от НАД построен остроумный способ индикации H. influenzae: его колонии вырастают рядом с бактериями (например, стафилококком), продуцирующими НАД (см. рисунок). Разумеется, что в этом случае необходимо использовать питательные среды, содержащие только один из ростовых факторов — гемин. Этого легко добиться, если кровяную добавку подвергнуть жесткой термической обработке, например, автоклавированию при 120°С.
продуцирующего фактор V/НАД
Кроме ауксотрофности (т.е. зависимости от ростовых факторов), характеристику H. influenzae как облигатного симбионта-паразита дополняет неустойчивость во внешней среде. Палочка инфлюэнцы быстро погибает вне организма, а потому распространяется лишь при непосредственных контактах путем воздушно-капельного распыления. Вся экология палочки инфлюэнцы связана с человеком, других ее резервуаров в природе не существует.
H. influenzae представляет собой мелкие (не более 1,5 мкм) палочки с закругленными концами. Характерно образование нитевидных (филаментозных) и других аномальных клеток. Эти бактерии грамотрицательны, спор не образуют, неподвижны, но, подобно всем грамотрицательным бактериям, имеют пили (фимбрии). Будучи факультативными анаэробами, лучше растут в аэробных условиях. Капсула (она построена из полисахаридов) является патогенетически важным, но не универсальным признаком. К тому же она выражена слабо и не заметна при обычной микроскопии. Чаще всего палочка инфлюэнцы живет на поверхности слизистой оболочки респираторного тракта и изредка выделяется из влагалища. Большинство штаммов, выделяемых от здоровых людей (колонизировано 50—80% населения) и из очагов местной инфекции (бронхит, пневмония, отит, синуситы), не имеют капсулы и ее антигенов (нетипируемые штаммы). Капсульные разновидности (они выделяются примерно от 5% здоровых людей) подразделяются на 6 типов: a, b, c, d, e, f. Дебатируется возможность приобретения или потери капсулы, в частности при S—R-диссоциации бактерий. Бескапсульные варианты рассматриваются как R-формы, которые при индукции зарепрессированных капсульных генов могут трансформироваться в капсульные S-варианты, обретая повышенную вирулентность. Впрочем, есть и другая версия, согласно которой капсульные и бескапсульные формы следует рассматривать как самостоятельные таксоны, не переходящие друг в друга. Об этом говорят существенные генетические различия фенотипически дискретных штаммов H.influenzae.
Капсула — главный атрибут инвазивности палочки инфлюэнцы. Она обеспечивает выживаемость бактерий в кровяном русле и дальнейшее развитие инфекционного процесса. Как уже говорилось, почти все случаи гнойного менингита, которым печально знаменита палочка инфлюэнцы, cвязаны c определенными b-клонотипами. Капсула b-типа представляет полимер рибозы и рибитола, скрепленных фосфорной кислотой. Подобно другим полисахаридам, построенным из однотипных, многократно повторяющихся блоков, b-капсульный полирибофосфат является Т-независимым антигеном, что накладывает существенный отпечаток на иммунитетные взаимоотношения с бактериями — носителями такого рода покрытий (см. ниже).
Из других факторов, имеющих отношение к патогенности, можно отметить липополисахаридный эндотоксин (он доминирует в развитии септического синдрома), пили (адгезия), IgA-протеазу (инактивация секреторных антител), фактор, подавляющий мукоцилиарный транспорт в системе реснитчатого эпителия (усиливает колонизацию). Никаких специфических токсинов у палочки инфлюэнцы не обнаружено, и вся ее болезнетворность связана, по-видимому, со способностью индуцировать пиогенное воспаление в зонах бактериальной инвазии — местных (например, в респираторном тракте) и/или гематогенных (менингит). В первом случае возбудитель пользуется «чужими» инфекционными и неинфекционными повреждениями слизистой оболочки, во втором — реализует свою агрессивность благодаря b-капсуле на фоне отсутствия антикапсульных антител.
Наиболее тяжелой патологией, связанной с палочкой инфлюэнцы, является гнойный менингит. В этом отношении с палочкой инфлюэнцы могут конкурировать лишь два вида бактерий — пневмококк и менингококк, причем в самой младшей возрастной группе (до 2—3 лет) H. influenzae претендует на абсолютное лидерство (см. таблицу).
Основные возбудители гнойного менингита
| Возраст | Бактерии | |
| Наиболее типичные | Прочие | |
| От рождения до 2 мес |
Str. agalactiae (группа В) | Е. coli Listeria monocytogenes |
| 2—60 мес | Н. influenzae (тип b) | N. meningitidis Str. pneumoniae |
| >60 мес | Str. рneumoniae | N. meningitidis* |
* Групповые заболевания – эпидемии.