Соотношения отдельных фракций фосфолипидов в биосубстратах, в частности ФЭА/ФХ, ЛФХ/ФХ, могут косвенно свидетельствовать об интенсивности метаболизма фосфолипидов и степени их окисления. Показано снижение индекса ЛФХ/ФХ (степень окисления фосфатидилхолина) у онкологических больных по сравнению с контролем. Наблюдали также тенденцию к снижению индекса ФЭА/ФХ по сравнению с контролем независимо от типа опухоли. В плазме крови больных РМЖ после лечения отмечено достоверное повышение индекса ЛФХ/ФХ и ФЭА/ФХ по сравнению с показателями до лечения.
Заключение. В крови пациентов со злокачественными новообразованиями молочной железы, головного мозга и лёгкого не отмечено существенных изменений содержания отдельных фракций фосфолипидов, но снижается соотношение ЛФХ/ФХ, что свидетельствует об активном использовании ЛФХ в биосинтезе ФХ и катаболическом распаде ЛФХ. При эпителиальных типах рака (РМЖ и РЛ) снижается содержание ФЭА, а также соотношение ФЭА/ФХ, что может быть связано с активацией окисления ФЭА. После лечения в крови больных раком молочной железы происходит нормализация фосфолипидного спектра крови. Данные показатели находятся на уровне практически здоровых доноров. Эти изменения свидетельствуют о компенсаторной перестройке мембран клеток в ответ на лечение опухоли и об эффективности терапии.
По всей видимости, именно анализ соотношения отдельных фракций фосфолипидов может быть использован для диагностики онкологических заболеваний.
С.А. Дерявый, Е.Н. Сенина, Ю.С. Градыкина, К.Э. Крощухина, К.С. Яшин
Свободнорадикальная активность крови в патогенезе глиом
Руководитель работы Л.М. Обухова, д.б.н., доцент кафедры биохимии им. Г.Я. Городисской НижГМА
Нижегородская государственная медицинская академия
Концентрация активных форм кислорода является одним из патогенетических факторов канцерогенеза (Шайн, 2004). Однако свободнорадикальная и антиоксидантная активность в малигнизированных клетках и биологических жидкостях различается в зависимости от вида и стадии злокачественных новообразований.
Цель — исследование свободнорадикальной активности и компонента антиоксидантной защиты каталазы крови при глиомах.
Материалы и методы. Исследована кровь 8 пациентов с глиомами головного мозга до проведения противоопухолевого лечения. Контрольную группу составили 10 практически здоровых людей. Свободнорадикальную активность плазмы крови оценивали методом индуцированной биохемилюминесценции (Кузьмина и др. , 1983) на биохемилюминометре БХЛ-07, сопряженном с компьютером IBM. Метод основан на разложении перекиси водорода ионами металла с переменной валентностью с вступлением образующихся радикалов в реакцию активации свободнорадикального окисления в биологическом субстрате, что приводит к образованию тетроксида, распадающегося с выделением кванта света, регистрируемого на БХЛ-07. Активность каталазы эритроцитов определяли методом Beerand Sizer (1952), основанном на убыли оптической плотности в области светопоглощения пероксида водорода при 240нм. Статистическая обработка данных проводилась с использованием пакета Biostat 4.3.
Результаты. Свободнорадикальная активность плазмы крови значимо возрастала (в 1,5 и более раз) при всех стадиях глиом головного мозга по сравнению с практически здоровыми людьми. Развитие бластоматозного процесса сопровождается повышением уровня супероксидного анион-радикала и других активных форм кислорода, развитием в организме состояния окислительного стресса (Miki, 2007).
Существует гипотеза, предполагающая участие активных форм кислорода, в частности супероксидного радикала и пероксида водорода, в регуляции пролиферации клеток (Меньщикова и др., 2008).
Активность каталазы эритроцитов у пациентов с глиомами также значимо превышала таковую у практически здоровых людей (в 1,7 раза). Известно, что активность каталазы в клетках глиом значительно выше, чем в нормальных астроцитах (Smith et al., 2007). Предполагается (Khoo et al., 2013), что изменение активности этого антиоксидантного фермента в клетках опухолей мозга может иметь большое значение при таргетной терапии.
Выводы. Определение активности каталазы эритроцитов с одновременным анализом свободнорадикальной активности плазмы крови может быть использовано в целях диагностики и оценки эффективности терапии глиом.
С.В. Фуфлыгина
Дисперсия электропроводности живых тканей как способ оценки их жизнеспособности
Руководители работы А.А. Гаврилова, к.б.н., О.В. Вавина, к.в.н.
Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия
Довольно точным методом оценки физиологического состояния биологического объекта является измерение некоторых электрофизиологических показателей, в частности дисперсии электропроводности, основные закономерности которой были изложены Б.Н. Тарусовым еще в 1968 г. Известно, что низкочастотное сопротивление ткани используется как критерий оценки жизнеспособности тканей при трансплантации (Опритов В.А. и др., 1991). Важным показателем является коэффициент К, показывающий, во сколько раз сопротивление при частоте 104 Гц отличается от сопротивления при 106 Гц: К=R104/R106.
Цель исследования — определение дисперсии электропроводности тканей в норме и при повреждении.
Материалы и методы. В качестве объектов исследования были взяты образцы растительных тканей кабачка и тыквы. Дисперсию электропроводности тканей измеряли методом мостовых схем (Чурмасов А.В., Хохолина Т.В., 2001). Принципиальная мостовая схема для измерения импеданса состояла из измерительного моста, низкочастотного генератора и осциллографа.
Результаты. Электрическое сопротивление растительной ткани определяли при частотах 50, 100, 500, 1000, 5000, 10000, 5·104, 105, 2·105 Гц. В качестве повреждаемых факторов выбрали температурный (нагревание путем помещения ткани в горячую воду на 10 мин, СВЧ-печь (при Р=800 Вт в течение 1 мин) или морозильную камеру (2–4°С, 30 мин), гниль мокрая бактериальная, СВЧ-излучение низкой интенсивности (мощность Р=0,01 мВт, частота f=2450 МГц в течение 1, 2 и 3 ч). Измерения проводили в трех повторностях.
В норме перелом кривой дисперсии, равный 2, наблюдался у кабачков при частоте 105 Гц. При поражении плодов гнилью, обусловленной неправильным хранением, уже при самых низких частотах (50 Гц) сопротивление отличалось от нормы в 16,7 раза: R50н/R50г=16, 7. Поскольку установка не позволяла делать замеры при 106 Гц (самой высокой частотой была 2·105 Гц), коэффициент К рассчитывался для частот 104 и 2·105 Гц. Ткани кабачка были наиболее чувствительны к изучаемым факторам, вплоть до отмирания. Так, при поражении гнилью, помещении в кипяток и СВЧ-печь коэффициент К при 104 и 2·105 Гц равнялся 1: К=R104/R2·105=1, в норме К=R104/R2·105=4,6, а при одночасовом, двухчасовом и трехчасовом низкоинтенсивном СВЧ-воздействии коэффициент К находился вблизи контрольных значений — 4; 3,2 и 4,3 соответственно. При чем при 2-часовой обработке наблюдалась «разбалансировка» — показания были неустойчивыми и спутанными.
При исследовании ткани тыквы оказалось, что перелом кривой дисперсии также происходит при частоте 105 Гц. Но по сравнению с данными кабачка в норме при низкой частоте (50 Гц) и высокой частоте (2·105 Гц) эти данные несколько отличались: R50нк/R50нт=1, 36; R2·105нк/R2·105нт=0,93. Для тыквы коэффициент К=R104/R2·105=4,3. Перелом кривой дисперсии для гнилой тыквенной ткани и при охлаждении происходил при той же частоте, что и для неповрежденной, 105 Гц, и лишь при воздействии кипятка он смещался к 5·104 Гц. Обработка мощным СВЧ-полем приводила к полной потере жизнеспособности. Нетепловое СВЧ-излучение сначала снижало коэффициент до 2,3 (при одночасовом воздействии), а затем, с увеличением длительности воздействия, повышало до 3,3 при 2 ч обработки, а при 3-часовом — почти до нормы, 4,2. Перелом кривой дисперсии при таком воздействии в основном происходил так же, как и для нормальной ткани при 105 Гц.