А.И. Кульчицкая, И.Г. Сметанкин
Изменения кислотно-щелочного баланса стекловидного тела у больных возрастной макулярной дегенерацией
Руководитель работы И.Г. Сметанкин, д.м.н., доцент, заведующий кафедрой глазных болезней и болезней уха горла и носа
Нижегородская государственная медицинская академия
Возрастная макулярная дегенерация (ВМД) представляет собой хронический дегенеративный процесс в хориокапиллярном слое, мембране Бруха, пигментном эпителии.
Этиология ВМД неизвестна. Многие авторы придерживаются мнения, что ВМД ассоциируется с патологией артериальных сосудов. Другие считают, что вероятность развития заболевания зависит от дисбаланса окислительно-восстановительных процессов на фоне дефицита локальной или общей антиоксидантной системы, а одним из пусковых механизмов является оксидантный стресс.
Поскольку процессы свободно-радикального окисления влияют на состояние кислотно-щелочного равновесия, цель нашей работы — исследовать кислотно-щелочной баланс стекловидного тела (СТ) у больных ВМД.
Материал и методы. Исследования проведены на 48 глазах 48 пациентов с ВМД и помутнениями хрусталиков. Всем больным выполнена закрытая субтотальная витрэктомия, экстракапсулярная экстракция катаракты, имплантация заднекамерной интраокулярной линзы.
Методика определения кислотно-щелочного равновесия: рН-метрия стекловидного тела in vivo и in vitro. In vivo рН-метрию проводили игольчатым электродом из высокочистой сурьмы и стеклянным (хлорсеребряным) электродом сравнения, заполненным 0,1% стерильным раствором хлорида калия; диаметр электродов составил соответственно 1,5 и 2,0 мм. Электроды вводили перед витрэктомией в разрезы склеры в области проекции плоской части цилиарного тела. Измерения осуществляли на приборе рН-340. In vitro измерения рН стекловидного тела оценивали на газоанализаторах “AVL-990” и «Radiometer». СТ забирали во время операции в количестве около 0,4 мл при помощи наконечника витреотома.
Анализ результатов подвергался обработке по рекомендованным методикам.
Результаты. В послеоперационном периоде не было реакций со стороны радужной оболочки и цилиарного тела. Клинически глаза успокаивались на 2–4-е сутки с момента операции. Результаты рН-метрии стекловидного тела in vitro (in vivo):
- у 24 больных 7,29–7,54 (7,34-7,46);
- у 6 больных 7,29-7,61 (7,41-7,60);
- у 8 пациентов 7,54-7,61 (7,54-7,60);
- у 7 пациентов 7,34-7,30.
Норма рН СТ по данным Я.И. Глинчука (1987) составляет 7,240±0,027. Таким образом, при рН-метрии СТ мы выявили алкалоз в пределах 7,29-7,61. Данные измерений in vivo и in vitro отличались незначительно. Степень биохимических изменений зависела от стадии ВМД: при более выраженных хориоретинальных изменениях степень алкалоза СТ была значительнее. По нашему мнению, при ВМД на фоне повреждения фоторецепторов и, следовательно, нарушения физиологической антиоксидантной (защитной) системы сетчатки происходит усиление ПОЛ, в результате чего в тканях накапливается свободнорадикальный кислород. В ответ на это развивается компенсаторная (защитная) реакция с участием антиоксидантов, связывающих свободнорадикальный кислород, в результате чего происходит защелачивание среды.
Алкалоз, в свою очередь, вызывая усиление протеолитической активности и повреждение мембранных структур, потенцирует развитие и прогрессирование дегенерации. Алкалоз оказывает регуляторное влияние на компенсаторные процессы в тканях, в основе которого лежит усиление свободнорадикального окисления, перекисного окисления липидов, заключающиеся в дефиците восстановительных эквивалентов.
В отличие от гипотезы А.М. Солдатовой, наши исследования и заключения по их данным показывают, что при ВМД имеет место дефицит восстановительных эквивалентов и физиологической антиоксидантной системы не только организма в целом, но и непосредственно световоспринимающего аппарата, как следствие повреждения пигментного эпителия сетчатки (ПЭС). Причиной повреждения и атрофии ПЭС может быть фотоинициирование свободнорадикальных процессов или гипоксия, развившаяся на фоне локальной хороидальной ишемии. Не исключена комбинация этих двух или других факторов.
Выводы. Биохимические изменения стекловидного тела при ВМД проявляются алкалозом, причиной которого могут быть компенсаторные реакции на фоне патологических свободнорадикальных, окислительно-восстановительных процессов и дефицита восстановительных эквивалентов.
Е.В. Балавина
Оценка фосфолипидного спектра крови больных со злокачественными опухолями различной локализации
Руководитель работы Т.А. Веселова, к.б.н., доцент кафедры биохимии и физиологии ИББМ
ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского»
В последнее время проводятся многочисленные исследования в области биохимии онкологического процесса. Показано, что липиды, в частности фосфолипиды, и ферменты их метаболизма могут являться маркерами как наличия опухолей, так и эффективности терапии.
Цель исследования — сравнительная оценка состава фосфолипидов крови онкологических больных с опухолями различной локализации, анализ состава фосфолипидов в плазме крови больных раком молочной железы на фоне терапии.
Материалы и методы. Объектом исследований служила плазма крови больных раком молочной железы до и после лечения (21 образец), раком лёгкого (23 образца), а также плазма крови больных со злокачественными новообразованиями головного мозга (21 образец) с гистологически подтвержденным диагнозом. На основании клинико-инструментального обследования и с учетом постхирургической классификации опухолей у больных установлена II и III стадия заболевания. Контролем служила плазма крови практически здоровых доноров.
Липиды плазмы экстрагировали по методу Фолча. Состав фосфолипидов анализировали методом ТСХ в системе растворителей хлороформ:метанол:вода (65:25:4). Для количественной оценки относительного содержания фосфолипидов пластинки, обработанные 5% раствором фосфорно-молибденовой кислоты, сканировали. Затем при использовании программы One—Dscan Version 1. 3 оценивали процентное содержание каждой фракции. В экстрактах плазмы крови идентифицированы фосфатидилэтаноламин (ФЭА), фосфатидилхолин (ФХ), сфингомиелин (СМ), лизофосфатидилхолин (ЛФХ).
Результаты. В плазме крови больных раком молочной железы, раком легкого, а также пациентов с опухолями головного мозга наблюдали тенденцию к снижению лизофосфатидилхолина и накоплению фосфатидилхолина по сравнению с показателями плазмы практически здоровых доноров. При раке молочной железы и раке легкого отмечено сниженное содержание ФЭА по сравнению с таковым в плазме крови доноров. Уровень СМ в крови больных с опухолями различной локализации практически не отличается от такового в контроле.
До лечения в крови онкологических больных наблюдается тенденция к снижению ЛФХ, СМ и повышению ФХ, а также достоверное снижение ФЭА. На фоне лечения происходит достоверное повышение ЛФХ, СМ, ФЭА и снижение ФХ в плазме крови больных РМЖ до контрольного уровня. Таким образом, результаты подтверждают данные клинических исследований об эффективности терапии.