В.Ю. Земко
Структура и распространенность возбудителей вентилятор-ассоциированной пневмонии в отделении реанимации и интенсивной терапии
Руководители работы В.К. Окулич, к.м.н., доцент, А.Н. Мамась, к.м.н., доцент
Витебский государственный медицинский университет, Беларусь
Вентилятор-ассоциированная пневмония (ВАП) является одной из актуальных проблем современной интенсивной терапии и пульмонологии. Это наиболее распространенное осложнение среди пациентов отделений реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ), получающих респираторную поддержку. Как показывают клинические наблюдения, возникновение ВАП возможно через 48 ч и ранее, особенно у больных в критическом состоянии.
Частота развития и характер ВАП, вызываемой тем или иным возбудителем, зависит, прежде всего, от микробиологического пейзажа конкретного отделения. ВАП возникает у 8–28% пациентов, находящихся на продленной искусственной вентиляции легких (ИВЛ), и является непосредственной причиной летального исхода у больных в критическом состоянии в 10—50% случаев.
Кроме этого, развитие ВАП продлевает пребывание больных в отделении интенсивной терапии, увеличивая затраты на лечение вдвое. В связи с этим важной представляется своевременная диагностика данного заболевания с целью максимально раннего начала антибиотикотерапии.
Цель: изучить структуру возбудителей вентилятор-ассоциированной пневмонии и их антибиотикорезистентность в ОРИТ ВОКБ за июнь–декабрь 2015 г.
Материалы и методы. Проведен анализ бактериологического исследования мокроты у 42 пациентов, находившихся на лечении в ОРИТ. Критерием для отбора больных служила длительность ИВЛ не менее 48 ч. У всех больных выполнялся забор мокроты методом эндотрахеальной аспирации или бронхоальвеолярного лаважа.
В целом были выделены и подвергнуты бактериологическому исследованию 54 штамма микроорганизмов и грибов. Микробиологические исследования производились на базе бактериологической лаборатории Республиканского научно-практического центра «Инфекция в хирургии».
Результаты. При исследовании отделяемого дыхательных путей у интубированных пациентов в 35,8% случаев выделялись ассоциации: ассоциации микроорганизмов — 23,1%, ассоциации микроорганизмов с грибами — 12,8%. Грамотрицательная флора составила 61,5% выделенных штаммов, грамположительная флора — 38,5%, грибы рода Candida — 12,8% случаев (в ассоциации с другими возбудителями). В посевах мокроты Staphylococcus aureus выделялся в 33,3% случаев, Acinetobacter spp. в 33,3%, Pseudomonas aeruginosa в 15,4%, Klebsiella pneumoniae в 7,7%, Сandida spp. — 12,8%, Streptococcus spp. 2,6%.
При анализе чувствительности к антибиотикам получены следующие результаты. Staphylococcus aureus был чувствителен к ванкомицину в 100% случаев, к амикацину — в 38,5% случаев. В то же время к офлоксацину, оксациллину, ципрофлоксацину, цефатоксиму, левофлоксацину было резистентно 100% штаммов, к клиндамицину — 92,3%.
У штаммов Pseudomonas aeruginosa установлена чувствительность к колистину в 100%, к амикацину — в 16,6%. К меропенему, имипенему, цефепиму, цефтазидиму, цефоперазону, ципрофлоксацину было резистентно 100% изолятов.
46,2% штаммов Acinetobacter spp. были чувствительны к ампициллину в сочетании с сульбактамом, 92,3% — к цефоперазону в сочетании с сульбактамом, но в 100% случаев была выявлена резистентность к амикацину, меропенему, имипенему, левофлоксацину, цефоперазону, цефепиму, ципрофлоксацину.
Все штаммы Klebsiella рneumoniae были чувствительны к имипенему, 66,7% — к меропенему и амикацину, но резистентны к амоксициллину, цефотаксиму, цефтазидиму, ципрофлоксацину, цефоперазону, офлоксацину.
Выводы. Современной эпидемиологической особенностью ВАП является преобладание в этиологической структуре грамотрицательной микрофлоры, представленной в основном Acinetobacter spp. В отделении реанимации и интенсивной терапии Витебской областной клинической больницы, исходя из данных о резистентности полученных штаммов, для лечения пневмонии, вызванной Staphylococcus аureus, рекомендуется использовать ванкомицин, Pseudomonas аeruginosa — колистин, Acinetobacter spp. — цефоперазон в сочетании с сульбактамом, а Klebsiella pneumoniae — имипенем. Установленные факторы риска возникновения внутрибольничных пневмоний требуют усиления самоконтроля за состоянием объектов госпитальной среды, обеспечения безопасности ИВЛ и разработки профилактических рекомендаций.
Л.О. Алиева1, В.П. Щукина1, Е.М. Гордина2, С.В. Поспелова1
Влияние линкомицина и ципрофлоксацина на биопленки, сформированные Staphylococcus aureus
1Пермский государственный медицинский университет им. академика Е.А. Вагнера; 2 Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет
Биопленкообразование — это сложный комплексный процесс, сформировавшийся эволюционно как способ выживания микроорганизмов в различных условиях обитания. Стафилококки обладают разнообразным набором факторов для его реализации. Это позволяет им «комфортно» существовать в неблагоприятных условиях и, самое главное, противостоять действию различных антибактериальных препаратов (Чеботарь И.В., 2012).
Внутри биопленок бактерии приобретают особые формы антибиотикорезистентности. Бактерии в составе биопленок, как правило, отличаются полирезистентностью ко многим антибактериальным препаратам (Sadovskaya I., 2010). Более того, известен факт усиления интенсивности биопленкообразования у штаммов Staphylococcus capitis в присутствии максимальных терапевтических концентраций оксациллина (Qu Y., 2010).
В клинических условиях такая высокая выживаемость сесильных бактерий приводит к неэффективности антибактериальной терапии и, как следствие, к хронизации инфекционного процесса (Коробов В.П., 2010).
Цель работы: оценить действие линкомицина и ципрофлоксацина на суточные биопленки, сформированные S. aureus.
Материалы и методы. Изучена биопленкообразующая способность 26 клинических изолятов S. aureus. Использовали 96-луночные полистироловые планшеты для иммуноферментного анализа. В 12 лунок каждого ряда планшета вносили по 100 мкл инокулума определенного штамма, после чего планшеты инкубировали в течение 24 ч (37°С). Через сутки планктонную культуру удаляли и биопленки дважды промывали фосфатным буфером (рН 7,2). Затем в несколько лунок каждого ряда вносили мясопептонный бульон (МПБ) с линкомицином и ципрофлоксацином в бактерицидной дозе. Планшеты инкубировали при температуре 37°С. Через час лунки промывали фосфатным буфером (рН 7,2).
Биомассу сформированных биопленок определяли при их окрашивании 0,1% раствором генцианвиолета с последующей спиртовой экстракцией связавшегося красителя. Детекцию окрашенных экстрактов биопленок осуществляли на ридере Benchmark Plus при длине волны 570 нм. Результаты выражали в единицах оптической плотности.
Степень интенсивности биопленкообразования (БПО) стафилококков определяли в соответствии с критериями S. Stepanovic. Минимальные подавляющие концентрации антибиотиков для изучаемых штаммов S. aureus определяли в соответствии с требованиями МУК 4.2.1890 (2004 г.).
Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием программы Statistica 6.0. О статистически значимых различиях полученных результатов в группах судили по величине цифровых значений р (критерий Манна‐Уитни). Критический уровень значимости (р) при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимался равным 0,05.
Результаты исследования. Все изученные штаммы S. aureus обладали способностью образовывать биопленки, причем 46,15±3,55% из них характеризовались низкой степенью биопленкообразования, 53,85±4,14% — средней.
При изучении влияния антибактериальных препаратов наблюдали усиление биопленкообразования. Так, под действием линкомицина на биопленки S. aureus среднее значение их толщины (единицы ОП) составило 0,401±0,029 (p=0,023); ципрофлоксацина — 0,559±0,040 (p=0,007); мясопептонный бульон (контроль) — 0,243±0,017 (р — статистическая значимость различий между антибактериальным препаратом и контролем). Следует отметить, что практически все тестируемые штаммы были более чувствительны к этому антибиотику.
Заключение. Линкомицин и ципрофлоксацин усиливают биопленкообразование S. aureus, причем действие последнего более выражено. Независимо от класса, антибактериальные препараты оказывали стимулирующее воздействие на формирование биопленок S. aureus.