Site icon Читальный зал

Секция № 8 Регенерация, адаптация, функциональная морфология и гомеостаз

[contents h2]

И.С. Эделев

Особенности определения миоглобина для диагностики инфаркта миокарда в судебной медицине

Руководитель работы А.Л. Федоровцев, д.м.н., заведующий республиканским судебно-цитологическим центром ГБУЗ НО НОБСМЭ

Нижегородское областное бюро судебно-медицинской экспертизы

 

В России на 100 тысяч человек от инфаркта миокарда ежегодно умирает 330 мужчин и 154 женщины. Для оптимизации танатологической экспертизы инфаркта миокарда представляется перспективным использование биохимических методов диагностики, в частности, определение уровня миоглобина в крови, так как изменения на молекулярном уровне проявляются раньше остальных.

Цель работы: исследование зависимости уровня миоглобина в крови от времени смерти, пола, возраста, а также метода анализа данного белка и времени хранения биологических объектов после танатологической экспертизы инфаркта миокарда.

Материалы и методы. Исследовали содержание миоглобина в крови 30 трупов лиц, умерших в результате острой сердечно-сосудистой недостаточности и хронической ишемической болезни сердца, в возрасте 41—95 лет (19 мужчин, 11 женщин). Уровень миоглобина определяли в реакции пассивной гемагглютинации с использованием эритроцитарного диагностикума «ДС-ЭРИТРО-МИОГЛОБИН» НПО «Диагностические системы» и иммунотурбидиметрическим тестом с использованием наборов «DiaSys Diagnostic Systems GmbH». Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета программ BIOSTAT.

Результаты исследования. Уровень миоглобина в сыворотке крови резко падает уже через несколько часов после наступления смерти, так как этот гемопротеин оседает на поверхности эритроцитов. В связи с этим при проведении экспертиз трупного материала оптимально определять содержание миоглобина не в сыворотке/плазме крови, как это рекомендовано для диагностики инфаркта миокарда у живых пациентов, а в гемолизате цельной крови.

При исследовании зависимости уровня миоглобина от срока давности наступления смерти было показано, что по прошествии 18–21 ч его уровень резко (более чем в 10 раз) возрастает. Учитывая литературные данные (Tomita Y., Nihira M., Ohno Y., Sato S., 2004; Резник А.Г., Иванов И.М., 2011) о более ранних процессах аутолиза в миокарде по сравнению со скелетной мускулатурой, выявленный пик миоглобина обусловлен именно постмортальными процессами в кардиомиоцитах.

При исследовании зависимости уровня миоглобина от времени хранения биологических объектов при температуре от +2 до +5°С было выявлено его снижение начиная с 9–10 ч после секционного исследования, что объясняется процессами распада этого белка (Zhang M., 2012).

Среднее значение уровня миоглобина крови, полученное с помощью пассивной гемагглютинации с использованием эритроцитарного диагностикума, на 40% выше, чем данные, полученные иммунотурбодиметрическим методом. Стандартное отклонение при применении полуколичественного метода, основанного на реакции пассивной гемагглютинации, гораздо выше, чем при использовании иммунотурбидиметрического теста. Целесообразным представляется использование эритроцитарного диагностикума в реакции пассивной гемагглютинации в качестве предварительного метода оценки уровня миоглобина — для выявления интенсивности разведения при осуществлении более точного количественного иммунотурбидиметрического теста.

Корреляционным анализом с использованием коэффициента ранговой корреляции Спирмена выявлена зависимость содержания миоглобина в крови от пола умерших, что согласуется с известными (Власова Н.В., Асташкина О.Г., 2010) данными о более высокой концентрации миоглобина в крови мужчин, что соответствует большей мышечной массе.

Выводы. В ходе судебно-биохимического исследования уровня миоглобина в крови трупов при диагностике инфаркта миокарда более информативным является его содержание в цельной крови; исследование должно проводиться не позднее 10–13 ч после наступления смерти. Результаты определения концентрации миоглобина в крови иммунотурбидиметрическим методом отличаются большей точностью и воспроизводимостью. Применение эритроцитарного диагностикума в реакции пассивной гемагглютинации оптимально в качестве метода предварительной оценки — для выявления интенсивности разведения при осуществлении количественного иммунотурбидиметрического теста.

 

Д.В. Блиничкина, Е.В. Яковлева

Структурные изменения органов ЖКТ у детей с сахарным диабетом

Руководители работы Ю.Р. Юнусова, доцент к.м.н., А.В. Шохин, врач УЗД

Самарский государственный медицинский университет

Сахарный диабет является одним из самых распространенных мультифакторных заболеваний текущего столетия, показатели заболеваемости которым приобрели в наши дни угрожающие масштабы. По данным ВОЗ, сейчас в мире насчитывается около 220 млн. больных сахарным диабетом.

Выделяют два типа сахарного диабета: 1-й тип — инсулинозависимый, или диабет молодых, и 2-й тип — инсулинорезистентный, или диабет пожилых, отличающиеся как по этиологии, так и по патогенезу. Ключевое звено патогенеза СД 1-го типа, встречающегося в детском возрасте, — прогрессирующая гибель В-клеток, ведущая к инсулинопении.

Влияние сахарного диабета на общее состояние организма велико, поскольку хроническая гипергликемия является причиной острых и хронических осложнений данного заболевания, связанных с нарушениями микроциркуляции, антиоксидантной защиты, КОС, сосудистой проницаемости, липидного обмена. Высокая распространенность сахарного диабета и тяжелые последствия его осложнений определяют актуальность разносторонних исследований данной патологии.

Цель исследования: статистически определить, какие изменения и в какой степени характерны для детей с сахарным диабетом со стороны органов желудочно-кишечного тракта.

Материалы и методы. Материалом служили заключения ультразвуковых исследований органов ЖКТ и данные гастробиопсий, проведенных в ДГКБ № 1 им. Ивановой (г. Самара) за 2014 г.

Результаты. За 2014 г. в эндокринологическом отделении находился 651 ребенок с СД, а на ультразвуковое исследование было направлено 536 детей, т.е. 82,3% из всех детей с СД, при этом среди них было 48,8% мальчиков и 51,2% девочек.

Анализ заключений УЗ-исследований выявил, что размер железы у детей при сахарном диабете, как правило, не изменяется (норма в 70,3% случаев), но в 15,7% случаев нами было обнаружено незначительное уменьшение размеров железы, что может быть связано с аутоиммунной деструкцией В-клеток и амилоидозом островков. Еще реже (14%) встречается увеличение железы, что также можно объяснить аутоиммунным механизмом, экссудативными процессами и инфильтрацией с нарушением топографии клеток. Структура железы в 40% случаев оказалась зернистой, в 3,5% случаев — диффузно неоднородной, а в 1,6% случаев — тяжистой.

Со стороны печени и желчного пузыря также были выявлены отклонения. Увеличение размеров печени наблюдалось у 14,9% детей, дисхолия — у 31,2%.

Помимо ультразвукового исследования, по показаниям выполнялась ФГЭДС с биопсией для оценки состояния слизистой оболочки желудка и ДПК. Гастробиопсии были выполнены 26 детям, что составляет 4,9% от всех случаев лечения в эндокринологическом отделении. Во всех 26 исследованиях (примем за 100%) выявлен хронический поверхностный гастрит, причем в 15,4% случаев — H. pylori-ассоциированный активный. В большинстве случаев (69,2%) диагностирован поверхностный неактивный гастрит, в 11,5% случаев — поверхностный неактивный с фовеолярной гиперплазией и в 3,8% (1 случай) — поверхностный активный гастрит.

Состояние желудочного эпителия: в 23% случаев указано на отсутствие существенных изменений, в 38% случаев — наличие небольших дистрофических изменений. В 19,2% случаев наблюдались нечеткие границы клеток эпителия, кроме того, в 2 случаях отмечено повышенное количество бокаловидных клеток, а в одном случае — уменьшение их числа.

Инфильтрация, выявленная во всех случаях, носит характер лимфоплазмоцитарной, причем в 3 случаях наблюдалось формирование лимфоидных фолликулов, а в одном случае — наличие единичных эозинофилов. По степени выраженности: 46,2% случаев — слабая инфильтрация, 34,6% — умеренная и 19,2% — выраженная. Кроме того, в 23% случаев обнаружен хронический дуоденит.

Ключевое звено патогенеза гастрита при сахарном диабете — микроангиопатии, вызванные метаболическими нарушениями и аутоиммунными процессами.

Выводы. Влияние сахарного диабета на организм, особенно детский, велико: данное заболевание может сопровождаться рядом серьезных изменений структуры и функции многих органов, в том числе желудочно-кишечного тракта.

 

В.В. Конорев, А.А. Афанасьев

Исследование влияния некоторых соединений 3-оксипиридина на электролитный дисбаланс при хроническом повреждении миокарда

Руководитель работы М.Н. Замотаева, к.м.н., доцент

Мордовский государственный университет имени Н.П. Огарева, г. Саранск

 

Результаты крупных эпидемиологических исследований свидетельствуют о неуклонном росте распространенности хронической сердечной недостаточности (ХСН) в мире. Совершенствование традиционных медикаментозных методов лечения ХСН представляется относительно исчерпанным. Важным и перспективным подходом к лечению больных ХСН является нормализация энергетического метаболизма в кардиомиоцитах.

Цель работы: исследовать возможность коррекции электролитного дисбаланса соединениями 3-оксипиридина при хроническом повреждении миокарда.

Материалы и методы. Исследование проводилось на 45 нелинейных белых крысах, содержащихся в стандартных условиях вивария. Было выделено 5 групп животных, по 9 крыс в каждой:

Исследуемые соединения вводили после формирования модели, внутрибрюшинно ежедневно, в течение 10 суток.

Содержание натрия и калия в плазме крови крыс определяли ионоселективным способом, который основан на том, что равновесный потенциал электродов в растворе электролита, содержащем определенные ионы, обратимо и избирательно зависит от концентрации этих ионов.

Результаты. Содержание калия в плазме крови крыс интактной группы составляет 5,06±0,36 ммоль/л, на фоне хронического повреждения миокарда без коррекции — 13,1±2,08 ммоль/л (ри<0,0005). При коррекции 3-оксипиридина сукцинатом калий плазмы был на уровне 14,66±3,76 ммоль/л (ри<0,0005), при использовании 3-оксипиридина гемисукцината — 8,43±1,48 ммоль/л (ри<0,0005), на фоне применения 3-оксипиридина фумарата — 8,59±0,98 ммоль/л (ри<0,0005, рк<0,005).

При анализе натрия плазмы крови крыс в интактной группе его уровень составил 140,78±2,61 ммоль/л, при хроническом повреждении миокарда без коррекции — 134,18±1,62 ммоль/л (ри<0,005). На фоне коррекции 3-оксипиридина сукцинатом натрий плазмы крови был 134,56±3,33 ммоль/л (ри<0,05), при применении 3-оксипиридина гемисукцината — 136,97±1,7 ммоль/л (ри<0,05, рк<0,05), при коррекции 3-оксипиридина фумаратом —141,81±2,36 ммоль/л (рк<0,0005).

Выводы. На фоне формирования хронического повреждения миокарда у крыс наблюдались гиперкалиемия и гипонатриемия. Данные, полученные в ходе исследования, свидетельствуют о том, что 3-оксипиридина фумарат наиболее эффективно корригирует как гиперкалиемию, так и гипонатриемию. 3-оксипиридина гемисукцинат нормализует содержание калия плазмы крови.

 

А.А. Егоров

Характеристика эндотелиоцитов сосудов головного мозга животных с церебральной ишемией на фоне введения «Лизиния»

Руководитель работы И.Ф. Беленичев, д.б.н., профессор

Запорожский государственный медицинский университет, Украина

 

Увеличение числа сосудистых заболеваний, в частности заболеваний сосудов головного мозга, обусловило рост количества острых нарушений мозгового кровообращения. Острые нарушения мозгового кровообращения (ОНМК) являются важнейшей медико-социальной проблемой, что обусловлено их высокой долей в структуре заболеваемости и смертности населения, а также значительными показателями временных трудовых потерь и первичной инвалидности.

Цель работы: изучить состояние эндотелиоцитов сосудов головного мозга в условиях моделирования ишемического инсульта на фоне введения «Лизиния».

Материалы и методы. Экспериментальные животные были разделены на три группы по 10 животных (контрольная, ложнооперированные животные, оперированные животные, которым вводили «Лизиний»). В эксперименте использовались беспородные крысы-самцы массой от 180 до 220 г. Ишемический инсульт моделировали двухсторонней перевязкой общих сонных артерий. Животные выводились из эксперимента путем декапитации на 4-е сутки. «Лизиний» ((S)-2,6диаминогексановой кислоты 3-метил-1,2,4-триазолил-5-тиоацетата, синтезирован на кафедре фармацевтической химии ЗГМУ под руководством проф. И.А. Мазура) вводили в дозе 50 мг/кг один раз в сутки. Для морфометрического исследования головной мозг по стандартной схеме заливали в парафиновые блоки, из которых готовили серийные фронтальные 5-микронные гистологические срезы. Для изучения морфофункционального состояния эндотелиоцитов капилляров IV–V слоев коры и сосудов головного мозга гистологические срезы депарафинировали по стандартной методике. Для анализа флюоресцентного изображения ядер эндотелиоцитов использовали 8-битную CCD-камеру COHU-4922, данные вводили в компьютерную систему анализа изображений VIDAS-386 (Kontron Elektronik, Германия).

Результаты исследования. При изучении состояния капилляров IV–V слоев коры на 4-е сутки моделирования ишемического инсульта выявлено уменьшение плотности ядер эндотелиоцитов на 47,83%, диаметра ядер — на 10,83% и снижение концентрации РНК на 38,21% относительно группы ложнооперированных животных. Экспериментальная терапия «Лизинием» увеличивала плотность и площадь ядер, а также концентрацию РНК эндотелиоцитов на 21,2, 17,8 и 48,6% соответственно, относительно группы контроля.

Изучение состояния эндотелиоцитов сосудов головного мозга показало, что на 4-е сутки церебральной ишемии отмечается снижение плотности ядер эндотелиоцитов на 42,56% и площади ядер — на 13,64%, на фоне уменьшения концентрации РНК в ядрах на 27,27% относительно группы ложнооперированных животных. Введение «Лизиния» увеличивало плотность и площадь ядер на 23 и 48,3% соответственно, при увеличении концентрации РНК в ядрах на 28,3% относительно контрольной группы.

Выводы. На 4-е сутки моделирования ишемического инсульта наблюдается значительное снижение плотности, площади, концентрации РНК в ядрах эндотелиоцитов капилляров IV–V слоев коры и сосудов головного мозга у подопытных крыс. Введение «Лизиния» обуславливает эндотелиопротективный эффект, который выражается в увеличении плотности и площади ядер эндотелиоцитов, а также в повышении в них концентрации РНК как в капиллярах IV–V слоев коры, так и в сосудах головного мозга.

 

М.Н. Замотаева, В.В. Конорев, В.В. Петров

Динамика изменения МДА в крови как показателя ПОЛ на фоне хронического повреждения миокарда и при коррекции производными 3-гидроксипиридина

Руководитель работы В.И. Инчина, д.м.н., профессор, зав. кафедрой фармакологии и клинической фармакологии с курсом фармацевтической технологии

Мордовский государственный университет имени Н.П. Огарева, Саранск

 

В прогрессировании хронической сердечной недостаточности (ХСН) наряду с гиперактивацией симпатико-адреналовой, ренин-ангиотензин-альдостероновой систем важную роль занимает перекисное окисление липидов (ПОЛ). Для оценки ПОЛ основным критерием является накопление первичных и вторичных продуктов свободнорадикального окисления. Один из таких продуктов — малоновый диальдегид (MДA), эндогенный альдегид, образующийся в результате метаболизма арахидоновой и других полиненасыщенных жирных кислот. Он является одним из ранних биологических маркеров окислительного стресса из группы продуктов оксидации. Увеличение уровня МДА может быть следствием нарушений в ферментативных механизмах антиоксидантной защиты.

Цель исследования: оценить возможность фармакологической коррекции показателя интенсификации процессов ПОЛ, малонового диальдегида, 3-гидроксипиридина ацетилцистеинатом и 3-гидроксипиридина фумаратом при хроническом повреждении миокарда у крыс.

Материалы и методы. Эксперимент выполнялся на 40 белых нелинейных крысах обоих полов, содержащихся в стандартных условиях вивария ФГБОУ ВПО «МГУ им. Н.П. Огарёва» со свободным доступом к воде и пище. Животные были поделены на 4 серии (по 10 крыс в каждой):

Изучаемые субстанции вводились внутрибрюшинно ежедневно, в течение десяти суток после формирования модели. В завершение эксперимента в плазме крови крыс определяли содержание малонового диальдегида.

Результаты. Уровень МДА у интактных животных составил 2,86±0,8 мкмоль/л. В контрольной группе он достоверно повысился на 159% (ри<0,0005). При использовании 3-гидроксипиридина ацетилцистеината уровень МДА достоверно увеличился по сравнению с интактными животными на 236,7% (ри<0,0005) и был выше, чем в контроле, на 30,1%. При коррекции 3-гидроксипиридина фумаратом уровень МДА достоверно превысил интактные значения на 67,8% (ри<0,005) и был ниже контроля на 35,1%.

Заключение. При моделировании хронического повреждения миокарда у крыс наблюдалось повышение содержания МДА примерно в 2,5 раза. Данная динамика свидетельствует об интенсификации процессов ПОЛ. Исследование показало, что 3-гидроксипиридина фумарат эффективно снижает активность перекисного окисления липидов при хроническом повреждении миокарда, а 3-гидроксипиридина ацетилцистеинат не влияет на нее.

 

Д.К. Черневский

Патоморфологическое исследование геномных болезней в Нижегородской области на примере синдромов Эдвардса и Патау

Руководитель работы Н.Ю. Орлинская, д.м.н., профессор кафедры патологической анатомии НижГМА

Нижегородская государственная медицинская академия

 

По данным современной литературы второе место по встречаемости (1:7000) среди аутосомных анеуплоидий делят синдром Патау (трисомия 13-й хромосомы) и синдром Эдвардса (трисомия 18-й хромосомы). Плод, имеющий одну из этих патологий, может дожить до рождения, но жизнеспособным не является вследствие выраженных нарушений развития, приводящих к ранней постнатальной смертности.

Цель работы: выявить частоту встречаемости и патоморфологические особенности редких полных аутосомных трисомий в Нижегородской области за последние 6 лет на примере синдромов Патау и Эдвардса.

Материалы и методы. Изучено 45 протоколов вскрытия детей, имевших трисомии по 13-й или 18-й хромосоме. Выборка произведена среди новорожденных и выкидышей Нижнего Новгорода и 15 районов Нижегородской области.

Результаты исследования. Средний возраст матерей составил 30 лет. Синдром Эдвардса встречается в три раза чаще, чем синдром Патау. В ходе исследования был выявлен 1 случай одновременной трисомии и 13-й, и 18-й хромосом.

Фенотипически синдром Патау характеризуется такими аномалиями лицевого и мозгового черепа, как микроцефалия, недоразвитость различных отделов ЦНС, низкий скошенный лоб, суженные глазные щели. Верхняя губа имеет выраженную расщелину, ушные раковины деформированы, нередко наблюдается полидактилия. Большинство новорожденных имеет пороки развития сердца: дефекты межжелудочковой и межпредсердной перегородок, транспозиции сосудов и др. Отдельные нарушения связаны с изменениями поджелудочной железы, селезенки, почек.

Дети с синдромом Эдвардса рождаются с малым весом. Их мозговой череп долихоцефалической формы. У всех больных выраженная гипоплазия мозжечка и мозолистого тела, изменения структур олив. Так же, как и при трисомии 13, имеют место деформация ушных раковин, уменьшение глазных щелей. Часто отсутствует мочка уха, козелок и наружный слуховой проход. Грудная клетка широкая и короткая. Характерной является форма стопы: пятка резко выступает, свод провисает, большой палец утолщен и укорочен. В большинстве случаев встречаются пороки сердца и крупных сосудов.

Выводы. Данные геномные мутации вызывают тяжелые и многообразные пороки развития плода, морфологические особенности эмбрионов представляют большой интерес как для патологоанатомов, так и для клиницистов и генетиков.

 

М.Л. Чуркова, О.В. Иванова, Е.А. Максимова, М.А. Матвеева

Гистотопографические особенности аргент-аффинных клеток в эпителии слизистой оболочки кишки морских свинок и медицинской пиявки

Руководитель работы С.В. Костюкевич, д.м.н., профессор

СЗГМУ им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург

 

Несмотря на то, что строение пищеварительной системы медицинской пиявки и морских свинок привлекало внимание исследователей, сравнение гистологического строения эпителия этих животных, а также количество и гистотопография энтерохромаффинных эндокринных клеток в эпителии желудочно-кишечного тракта вышеуказанных классов животных требуют дальнейшего изучения.

Цель работы: выявление в эпителии кишки медицинской пиявки и морских свинок эндокринных ЕС-клеток, продуцирующих гормон серотонин, который оказывает влияние на моторику желудочно-кишечного тракта, регулирует процессы пищеварения и гомеостаз организма в целом.

Материал и методы. Исследовали две группы интактных животных: морских свинок (7 особей), медицинских пиявок — Hirudo medicinalis (5 особей). Объект исследования: эпителий слизистой оболочки тонкой и толстой кишки указанных животных. Материал фиксировали в 10% растворе забуференного формалина, срезы толщиной 4–6 мкм изготавливали на ротационном микротоме. Для обзорного анализа препараты окрашивали гематоксилином-эозином. Эндокринные клетки выявляли с помощью реакции Массона. Для анализа гистологического строения эпителия применяли метод световой микроскопии. Количество EC-клеток на 1 мм2 поверхности среза эпителия слизистой оболочки определяли с использованием окулярной морфометрической сетки в 100 полях зрения, окуляр х7, объектив х40. Статистическую обработку количественных показателей проводили с учетом значимости различий по параметрическому критерию Стьюдента при p<0,05.

Результаты исследования. Сравнительный анализ кишечных эпителиев пиявок и морских свинок показал, что наряду с определенными различиями, которые могут быть объяснены особенностями функционирования пищеварительных систем, имеют место и значительные черты сходства. Отмечено подобие в строении всасывающих, секреторных, пищеварительных, слизистых и эндокринных клеток. Однако в связи с особенностями питания у кровососущих пиявок в эпителиальном пласте отсутствует четкая дифференцировка клеток на всасывающие и секреторные. У морских свинок основную массу эпителия составляют всасывающие клетки с хорошо развитой щеточной каемкой, в эпителии слизистой оболочки толстой кишки наблюдается большое количество бокаловидных клеток округлой формы. Отмечается наличие полиморфных ворсинок в эпителии тонкой кишки, в толстой кишке — многочисленные складки и крипты, выявляется хорошая васкуляризация.

В эпителии слизистой оболочки кишки пиявок реакцией Массона были определены единичные мелкогранулированные эндокринные ЕС-клетки, локализованные в эпителии средней части крипт кишки. У морской свинки ЕС-клетки были выявлены преимущественно на дне крипт кишки. Клетки отличались по форме и размеру; преобладали клетки овальной формы и открытого типа, достигающие своим апикальным концом просвета кишки. Статистический анализ показал, что в эпителии слизистой оболочки кишки морских свинок общее количество ЕС-клеток составляет 166±8,5 на 1 мм2 поверхности среза эпителия.

Заключение. Выявленные различия в количественном содержании эндокринных ЕС-клеток в эпителии слизистой оболочки кишки медицинской пиявки и морских свинок свидетельствуют о разноплановости метаболизма указанных животных и различной интенсивности процессов пищеварения.

 

А.Е. Мирошниченко, Е.П. Михеева, П.А. Скалина

Морфологическая оценка лимфоидной инфильтрации в узловых образованиях щитовидной железы

Руководитель работы Н.Ю. Орлинская, д.м.н., профессор кафедры патологической анатомии НижГМА

Нижегородская государственная медицинская академия

 

Местное проявление иммунных реакций — лимфоидноклеточная реакция стромы желез, которая обнаруживается при разной форме тиреопатологии. Однако на светооптическом уровне невозможно определить долю участия различных субпопуляций лимфоцитов, можно только оценивать степень ее выраженности — очаговый или диффузный, и учитывать в количественном выражении морфологически. Общепринято, что иммунокомпетентные клетки сдерживают опухолевый рост и способны разрушать опухолевые клетки. Поэтому в злокачественных опухолях некоторых локализаций наличие лимфоидных инфильтратов расценивают как хороший прогностический признак.

Интересной представляется не только количественная оценка лимфоидной инфильтрации в опухолях щитовидной железы, но и ее качественная оценка.

Цель исследования: выявить выраженность и качественный состав лимфоидной инфильтрации в узловых образованиях щитовидной железы.

Материалы и методы исследования. Объектом исследования стал операционный материал, полученный при хирургическом лечении 267 пациентов с узловой патологией щитовидной железы (32% мужчин, 68% женщин, средний возраст больных 53±1,3 года). Для морфометрического исследования использовалась морфометрическая сетка Г.Г. Автандилова. Статистическая обработка материала проводилась с помощью программы «Медстат» и персонального компьютера.

Результаты исследования. В динамике изучали выраженность лимфоидной инфильтрации в узловых образованиях щитовидной железы. Все узловые образования щитовидной железы после постановки морфологического диагноза были разделены на три группы: узловой полиморфно-пластический зоб, аденомы, рак щитовидной железы. В большей степени лимфоидная инфильтрация выявлялась при злокачественных новообразованиях щитовидной железы, лишь в 9% случаев лимфоидные инфильтраты в строме отсутствовали. В меньшей степени этот процесс отмечен при полиморфно-пластическом зобе, где лимфоидная инфильтрация отсутствовала в 58% желез.

Обращает на себя внимание зависимость между соотношением Т- и В- лимфоцитов и степенью злокачественности узловых образований щитовидной железы. В злокачественных образованиях преобладали Т-лимфоциты.

Выводы. Лимфоидная инфильтрация может помочь не только в дифференциальной диагностике аденомы и рака щитовидной железы (в злокачественных узловых образованиях инфильтратов 90,8%, по сравнению с аденомой, например — 65,1%), но и в определении прогноза.

 

М.Ф. Хуснияров, Э.Ф. Загидуллин, А.М. Сафин

Влияние 2-часового холодового воздействия на фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови белых крыс

Руководитель работы Д.А. Еникеев, профессор, д.м.н.

Башкирский государственный медицинский университет, Уфа

 

Холодовая травма негативно влияет на фагоцитарную активность иммунокомпетентных клеток, что показано на исследовании активности нейтрофилов.

Цель работы: оценить влияние 2-часового холодового воздействия на фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови белых крыс.

Материалы и методы исследования. Эксперимент выполнен на 20 здоровых половозрелых белых крысах мужского пола массой от 250 до 300 г. Животных содержали на стандартном рационе вивария. При выполнении экспериментов соблюдались Международные рекомендации по использованию животных в биологических и медицинских исследованиях согласно Хельсинкской декларации.

Холодовой стресс индуцировали помещением животных в холодильную камеру при температуре +4°С (Кормильцина Н.К., 1990; Линчевская А.А. и др., 1986). В соответствии с целью исследования были сформированы две экспериментальные группы. Животные основной группы однократно подвергались холодовому воздействию; длительность экспозиции составляла 120 мин. Одна из групп служила контролем.

Поглотительную активность нейтрофилов периферической крови белых крыс определяли по методу А.Н. Маянского и др. (1993). Учет реакции проводили с помощью иммерсионного микроскопа (Биолам). Статистическую обработку результатов выполняли с применением программных пакетов математико-статистического анализа Microsoft Excel 2010 и Statistica 10.0.

Результаты. Активность фагоцитоза в основной группе через 30 мин инкубации смеси латекса с кровью в термостате на первые сутки после холодового воздействия составила 60,61±1,15%; на третьи сутки — 61,48±1,21%; на пятые сутки — 78,59±1,19%; в контрольной группе на первые сутки — 79,42±1,26%; на третьи сутки — 79,17±1,24%; на пятые сутки — 79,58±1,33%.

Фагоцитарное число в основной группе через 30 мин инкубации смеси латекса с кровью в термостате на первые сутки после холодового воздействия равнялось 3,04±0,13; на третьи сутки — 3,08±0,14; на пятые сутки — 4,02±0,11; в контрольной группе на первые сутки — 4,08±0,15; на третьи сутки — 4,06±0,11; на пятые сутки — 4,11±0,14.

Таким образом, 2-часовая холодовая травма приводит к статистически значимому (p<0,05) угнетению активности и интенсивности фагоцитоза через 30 мин после начала инкубации смеси латекса с кровью в термостате. Эти изменения сохраняются в течение первых 72 ч после воздействия холода. В более поздние сроки отсутствуют статистически значимые различия между основной и контрольной группами по основным показателям фагоцитоза.

Заключение. Выявлено угнетающее влияние 2-часового холодового воздействия на фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови белых крыс, сохраняющееся в течение 72 ч, о чем свидетельствует статистически значимое (p<0,05) снижение активности и интенсивности фагоцитоза.

Полученные нами данные могут послужить основой для дальнейшего исследования активности иммунокомпетентных клеток при действии на организм холодовой травмы.

 

Д.Б. Бондаренко, А.В. Коровянский, И.А. Арапов, С.А. Мзикян

Особенности роста, строения и формообразования длинных трубчатых костей при травме опорно-двигательного аппарата в условиях экспериментальной гипергомоцистеинемии

Руководители работы Л.И. Чистолинова, к.м.н., доцент кафедры нормальной анатомии человека, Д.П. Березовский, к.м.н., доцент, заведующий кафедрой судебной медицины

Ростовский государственный медицинский университет

 

Гипергомоцистеинемия (ГГЦ) на сегодняшний день считается одним из независимых факторов риска тромботических осложнений. Однако в научной литературе встречается информация о том, что ГГЦ может быть одной из причин остеопороза. Тем не менее, в доступной нам научной литературе отсутствуют систематизированные сведения о влиянии ГГЦ на рост, строение и формообразование костей скелета в различные возрастные периоды при травме опорно-двигательного аппарата.

Нами выдвинута гипотеза, что ГГЦ опосредованно, через дисфункцию эндотелия сосудов микроциркуляторного русла, влияет на рост, строение и формообразование костей скелета в различные возрастные периоды при травме опорно-двигательного аппарата.

Цель исследования: изучить особенности роста, строения и формообразования костей скелета при травме опорно-двигательного аппарата в условиях ГГЦ.

Материалы и методы. База исследования — кафедра судебной медицины. Эксперимент поставлен на 24 беспородистых половозрелых крысах-самцах массой 120–150 г. Все животные были рандомизированы в одну из экспериментальных групп:

По окончании срока (1 месяц) животных выводили из эксперимента. Методом остеометрии изучали такие показатели длинной трубчатой кости, как длину плечевой кости, передне-задний размер проксимального эпифиза плечевой кости, боковой размер проксимального эпифиза плечевой кости, передне-задний размер середины диафиза плечевой кости. Результаты подвергались статистической обработке с определением среднего значения и ошибки среднего. Достоверность различий в случае нормального распределения оценивали с использованием t-критерия Стьюдена (p<0,05).

Результаты исследования. Длина плечевой кости в I группе составила 23,08±0,40 мм, во II группе — 24,09±0,23 мм, в III группе — 23,07±0,27 мм, в IV группе — 23,36±0,22 мм.

Передне-задний размер проксимального эпифиза плечевой кости в I группе был 5,17±0,17 мм; во II группе — 5,26±0,13 мм; в III группе — 5,09±0,12 мм; в IV группе — 5,15±0,08 мм.

Боковой размер проксимального эпифиза плечевой кости в I группе составил 5,17±0,11 мм, во II группе — 5,25±0,13 мм, в III группе — 5,08±0,12 мм, в IV группе — 5,14±0,7 мм.

Показатели бокового размера середины диафиза плечевой кости в I группе были равны 1,85±0,1 мм, во II — 1,95±о,о6 мм, в III — 1,86±0,4 мм, в IV группе — 1,89±0,4 мм.

Статистически значимые различия остеометрических показателей были получены лишь для животных II экспериментальной группы.

Выводы. Полученные результаты позволяют утверждать, что длительное повышенное содержание гомоцистеина в плазме крови оказывает угнетающее влияние на рост, строение и формообразование длинных трубчатых костей.

 

С.А. Саргсян, О.Н. Антошкин, А.В. Терентьев, О.А. Пикалова

Апоптоз нейронов коры больших полушарий головного мозга у крыс при воздействии стрессорных факторов

Руководитель работы В.Л. Загребин, к.м.н., доцент, заведующий кафедрой гистологии, эмбриологии, цитологии ВолгГМУ

Волгоградский государственный медицинский университет

 

Нейродегенеративные заболевания, проявляющиеся прогрессирующим снижением интеллекта независимо от национальности или социально-экономического статуса, являются одной из самых распространенных причин старческого слабоумия.

Ключевое звено патогенеза протеинопатии — образование двух типов характерных гистопатологических включений: сенильных бляшек и нейрофибриллярных клубков. Оба эти компонента рассматриваются как перспективные молекулярные мишени, воздействие на которые позволит замедлить или остановить нейродегенеративный процесс.

Цель работы — выявление морфологических изменений нейронов коры больших полушарий головного мозга при стрессорной нейродегенерации с амилоидогенезом в эксперименте.

Материалы и методы. Исследование выполнено на 20 нелинейных белых крысах-самцах в возрасте 24 месяцев. Стресс воспроизводился методом комбинированного ежедневного 30-минутного воздействия вибрации, шума и света на крыс в течение 7 дней. Были сформированы группы по 10 животных в каждой:

О психоневрологическом состоянии животных судили по их поведению в тестах «открытого поля» (ОП), «условной реакции пассивного избегания» (УРПИ). «Обучение» и «воспроизведение 1» в тесте УРПИ проводились с интервалом 24 ч. «Воспроизведение 1» и первое тестирование в «открытом поле» выполнялись за день до начала моделирования комбинированного стрессорного воздействия. «Воспроизведение 2» в тесте УРПИ и второе тестирование в «открытом поле» осуществлялись на следующий день после окончания стрессорного воздействия.

После окончания эксперимента животные забивались, гистологическому исследованию подвергались большие полушария головного мозга. На микротоме изготавливались серийные фронтальные срезы в ростро-каудальном направлении, толщиной 7 мкм, в обработку брались стекла лобной, теменных и височных долей головного мозга. Гистологические препараты окрашивались на базофильное вещество по Нисслю и конго красным на амилоид.

Результаты и обсуждение. Стрессорное воздействие вибрации, шума и света семикратно по 30 мин ежедневно в равной степени снижало двигательную и ориентировочно-исследовательскую активность у животных.

У интактных животных на фронтальных срезах коры большого мозга нейроны и глиальные клетки имели нормальную структуру с выраженным перикарионом нейроцитов, отражающим активную синтетическую функцию.

Во второй группе стрессированных животных были выражены признаки нейродегенеративных изменений в нейронах соматосенсорной коры больших полушарий головного мозга. Отмечалось уменьшение плотности сосудов микроциркуляторного русла. Нейроны имели преимущественно крупное светлое, практически прозрачное ядро, занимающее более половины цитоплазмы. В ядре эксцентрично располагались сегрегированные ядрышки, зачастую неправильной вытянутой формы.

При окраске тионином вещество Ниссля в цитоплазме практически не определялось. Отмечались нейроны с явными признаками апоптоза: пикнотическое ядро, крупные глыбки гетерохроматина, с деформированным ядрышком, сморщенной цитоплазмой. При окраске конго красным на амилоид и с докраской ядер гематоксилином выявлены белковые внутриклеточные включения и внеклеточные фибриллярные структуры, характеризующие качественные изменения, связанные с протеинопатией и выработкой патологических белков. Выявлено достоверное увеличение амилоидных отложений в нейронах коры головного мозга стрессированных крыс.

Выводы. Стрессорные воздействия у крыс вызывают нейродегенеративные изменения нейронов коры больших полушарий головного мозга, характеризующиеся выраженными явлениями апоптоза нервных клеток с нарушением белкового обмена в виде внутри- и внеклеточного накопления амилоида.